LeapWal PolyShooter 蛋白轉染試劑 P19103的相關知識

　　轉染技術是指將外源分子如DNA，RNA等導入真核細胞的技術，它是研究基因表達調控，突變分析等的常規(guī)工具。隨著功能研究的興起，其應用越來越廣泛。
 

　　LeapWal PolyShooter 蛋白轉染試劑 P19103可分為兩大類，一類是瞬時轉染，一類是穩(wěn)定轉染(轉染)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中，因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數(shù)，產(chǎn)生高水平的表達，但通常只持續(xù)幾天，多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說，超螺旋質粒DNA轉染效率較高，在轉染后24-96小時內(依賴于各種不同的構建)分析結果，常常用到一些報告系統(tǒng)如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫助檢測。后者也稱穩(wěn)定轉染，外源DNA既可以整合到宿主染色體中，也可能作為一種游離體(episome)存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉入量低但整合率高。外源DNA整合到染色體中概率很小，大約1/104轉染細胞能整合，通常需要通過一些選擇性標記，如來氨丙基轉移酶(APH；新霉素抗性基因)，潮霉素B磷酸轉移酶(HPH)，胸苷激酶(TK)等反復篩選，得到穩(wěn)定轉染的同源細胞系。
 

　　LeapWal PolyShooter 蛋白轉染試劑 P19103在使用前需要加血清。胎牛血清(FCS)經(jīng)常用到，便宜一點的有馬或牛血清。通常的，血清是一種包含生長因子及其它輔助因子的不確切成分的添加物，對不同細胞的生長作用有很大的差別。血清質量的變化直接影響轉染效率。
 

　　因此在轉染前建議先測(轉右)，試出對細胞生長良好的血清批號，轉染時用同一批號的血清，并同時做負對照(不加轉染試劑及外源DNA)以測試細胞生長是否正常。有些轉染技術如脂質體轉染在有血清存在情況下效率很低，因此在轉染前要除血清。但有些對此敏感的細胞如原代細胞會受到損傷，甚至死亡導致轉染效率低。